1.凯氏定氮法定氮瓶为何斜着放呢

2.凯氏定氮法与分光光度法的优缺点

3.凯氏定氮法在蒸馏时为什么吸收液一直未变成蓝绿色

4.有谁知道凯氏定氮的具体步骤,注意事项,!!

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凯氏定氮法测核酸,氮含量是12%~19%。凯氏定氮法原理是:通过测氮的含量而得出蛋白质含量.公式:蛋白质含量=蛋白氮X6.25(注:氮元素占蛋白质中组成百分比为16%,式子中的6.25是16%的倒数)凯氏定氮法测定的氮,包括蛋白质中的氮还有样品中其它的氮.所以测得结果高于样品蛋白质的实际含量。

凯氏定氮法定氮瓶为何斜着放呢

(1)蛋白质的含氮量为16%,则以含氮量来估算蛋白质含量所乘以的系数应为:

1
16%
=6.25,

故答案为:6.25;?

(2)①凯式定氮法的主要原理为:将样品与硫酸和催化剂一起加热,使蛋白质分解,所以需要加热的是蒸馏烧瓶;加热圆底烧瓶产生水蒸气,进入试管中将生成的氨气吹出;加热产生水蒸气,装置内压强增加,长导管防止装置中压力过大而发生危险,冷却时防止发生倒吸,起安全管作用;根据反应原理,大试管中硫酸铵与氢氧化钠溶液反应生成氨气,反应的离子方程式为:NH4++OH-

?高温?
.
?
NH3↑+H2O;冷凝管的通水方向应该为逆向通水,即从B进水,

故答案为:圆底烧瓶;安全管(或:防止装置中压力过大而发生危险;防止冷却时发生倒吸);NH4++OH-

?高温?
.
?
NH3↑+H2O;B;

②对照使用目的是消除其他试剂、实验操作等因素引起的误差,不做空白对照实验,消耗的盐酸量增大,引起实验结果偏高,

故答案为:消除其它试剂、实验操作等因素引起的误差;

③滴定时(NH4)2B4O7重新转化为H3BO3,同时反应生成了氯化铵,反应的化学方程式为:(NH4)2B4O7+2HCl+5H2O=4H3BO3+2NH4Cl,

故答案为:(NH4)2B4O7+2HCl+5H2O=4H3BO3+2NH4Cl;

④盐酸的体积为:

33.45ml+33.55ml+33.50ml?
3
-1.5ml=32.00ml=0.03200L,设10ml该液态奶的含氮量的质量为mg,则

2N~(NH4)2B4O7~2HCl

28g 2mol

mg 0.03200L×0.1000mol/L

则m×2mol=28g×0.03200L×0.1000mol/L,

解得:m=0.0448g=44.8mg,

该液态奶的含氮量为

44.8mg
10mL
=4.480mg/mL;

故答案为:32.00;4.480.

凯氏定氮法与分光光度法的优缺点

凯氏定氮法定氮瓶为何斜着放:这样溶液不易爆沸外溢。使用时先将博美凯氏定氮烧瓶洗净、烘干,用铝箔放在天平上称取被测物的重量,然后用铝箔包好,一起放到定氮烧瓶中,放入硫酸,加热,使被测物与硫酸反应生成硫酸铰,必须注意在加热时烧瓶需要倾斜45。角,使瓶内溶液不易爆沸外溢。定氮测定如用直形装置时,必须在定氮烧瓶口上加上一只定氮球进行保护,并需要与氮气球相连接。

凯氏定氮法在蒸馏时为什么吸收液一直未变成蓝绿色

凯氏定氮法的优点:可用于所有食品的蛋白质分析中;操作相对比较简单;实验费用较低;结果准确,是一种测定蛋白质的经典方法;用改进方法(微量凯氏定氮法)可测定样品中微量的蛋白质。

缺点:最终测定的是总有机氮,而不只是蛋白质氮;实验时间太长(至少需要2h才能完成);精度差,精度低于双缩脲法;所用试剂有腐蚀性。?

分光光度法的优点:灵敏度高;仪器设备简单,操作简便、快速;应用广泛。

缺点是:准确度相对不高;有的检测不可用,有限制性。

蛋白质与硫酸和催化剂一同加热消化,使蛋白质分解,分解的氨与硫酸结合生成硫酸铵。然后碱化蒸馏使氨游离,用硼酸吸收后再以硫酸或盐酸标准溶液滴定,根据酸的消耗量乘以换算系数,并换算成蛋白质含量。

扩展资料:

在有催化剂的条件下,用浓硫酸消化样品将有机氮都转变成无机铵盐,然后在碱性条件下将铵盐转化为氨,随水蒸气蒸馏出来并为过量的硼酸液吸收,再以标准盐酸滴定,就可计算出样品中的氮量。由于蛋白质含氮量比较恒定,可由其氮量计算蛋白质含量,故此法是经典的蛋白质定量方法。

物质与光作用,具有选择吸收的特性。有色物质的颜色是该物质与光作用产生的。即有色溶液所呈现的颜色是由于溶液中的物质对光的选择性吸收所致。

由于不同的物质其分子结构不同,对不同波长光的吸收能力也不同,因此具有特征结构的结构集团,存在选择吸收特性的最大实收波长,形成最大吸收峰,而产生特有的吸收光谱。

百度百科——凯氏定氮法

百度百科——分光光度法

有谁知道凯氏定氮的具体步骤,注意事项,!!

溴甲酚绿-甲基红混合指示剂在碱性溶液中呈绿色、蓝绿色。没变色说明吸收液中氨的量不够,有可能的原因:蒸馏时加入的NaOH量不够;漏斗下端未保持液封,有氨逸出;微量凯氏定氮蒸馏装置的密封性不好;消化时加入的硫酸钾过多,使消化体系温度过高,引起已生成的铵盐发生热分解而造成氨损失。

1、消化:精密称取大豆样品1.0g左右,放入干燥的250 ml消化管中,加入0.4g CuSO4 7g K2SO4 10ml H2SO4先200'C炭化,待泡沫停止后提高温度到450'C,加热至液体沸腾,待瓶内液体呈蓝绿色透明后,再继续加热0.5h。

冷却后加入20ml水,移入100ml容量瓶中,用少量水洗涤消化管2~3次,洗液合并于容量瓶中定容。

2、蒸馏:连接凯氏定氮装置,于水蒸气发生瓶内装水至2/3处,加甲基红指示剂数滴及数ml硫酸,保持水呈酸性。加入数粒玻璃珠以防暴沸,调节火力加热煮沸水蒸气发生瓶内的水。

3、向吸收瓶内加入20g/L硼酸溶液20ml及混合指示剂2滴,并使冷凝管下端插入液面以下,吸取10ml样品消化稀释液由进样口进入反应室,并以10ml水洗涤进样口使其流入反应室内,将400g/L NaOH溶液10ml倒入进样口,立即夹紧螺旋夹,并加入少量蒸馏水,密封进样口。

当蒸汽通入反应室时,准确计时,反应产生的氨气通过冷凝管进入吸收瓶,蒸馏5min,移动吸收瓶,使冷凝管下端离开液面,再蒸馏Imin,然后用少量水冲洗冷凝管下端外部,取下吸收瓶。

停止加热,使反应室内的液体进入汽水分离器,打开进样口的螺旋夹,将汽水分离器的液体放出。再向反应室内加入蒸馏水,夹紧螺旋夹,再次进行加热至水蒸汽放出,停止加热,使反应室内的水进入汽水分离器,进行洗涤。

4、滴定:用0.025mol/L硫酸标准溶液滴定吸收液至灰色。

5、计算:X= 2cVX 14X5.71/m

X为样品中蛋白质的含量,%;c为硫酸标准溶液的浓度,molL;V为样品消化液消耗硫酸标准溶液的体积,ml;m为样品的质量,g。

注意事项

(1) 样品应是均匀的。固体样品应预先研细混匀,液体样品应振摇或搅拌均匀。

(2) 样品放入定氮瓶内时,不要沾附颈上。万-沾附可用少量水冲下,以免被检样消化不完全,结果偏低。

(3) 消化时如不容易呈透明溶液,可将定氮瓶放冷后,慢慢加入30%过氧化氢(H2O2)2-3ml,促使氧化。

(4) 在整个消化过程中,不要用强火。保持和缓的沸腾,使火力集中在凯氏瓶底部,以免附在壁上的蛋白质在无硫酸存在的情况下,使氮有损失。

(5)如硫酸缺少, 过多的硫酸钾会引起氨的损失,这样会形成硫酸氢钾,而不与氨作用。因此,当硫酸过多的被消耗或样品中脂肪含量过高时,要增加硫酸的量。

(6)加入硫酸钾的作用为增加溶液的沸点,硫酸铜为催化剂,硫酸铜在蒸馏时作碱性反应的指示剂。

(7)混合指示剂在碱性溶液中呈绿色,在中性溶液中呈灰色,在酸性溶液中呈红色。如果没有溴甲酚绿,可单独使用0.1%甲基红乙醇溶液。

(8) 氨是否完全蒸馏出来,可用PH试纸试馏出液是否为碱性。

扩展资料:

凯氏定氮法原理

凯氏定氮法首先将含氮有机物与浓硫酸共热,经一系列的分解、碳化和氧化还原反应等复杂过程,最后有机氮转变为无机氮硫酸铵,这一过程 称为有机物的消化。

为了加速和完全有机物质的分解,缩短消化时间,在消化时通常加入硫酸钾、硫酸铜、氧化汞、过氧化氢等试剂,加入硫酸钾可以提高消化液的沸点而加快有机物分解,除硫酸钾外,也可以加入硫酸钠、氯化钾等盐类类提高沸点,但效果不如硫酸钾。

硫酸铜起催化剂的作用。凯氏定氮法中可用的催化剂种类很多,除硫酸铜外,还有氧化汞、汞、硒粉、钼酸钠等,但考虑到效果、价格及环境污染等多种因素,应用最广泛的是硫酸铜。

参考资料:

百度百科-凯氏定氮法